培养箱中的多板位活细胞监测分析系统--IncuCyte 赛多利斯（上海）贸易有限公司品牌：Sartorius 两板位型号：IncuCyte SX1 六板位型号：IncuCyte S3/SX5 培养箱内运行示意图 目前，大部分的细胞检测方法采用的仍然是终点法—比如...
基于实时动态活细胞成像技术的人肝胆管癌细胞（RBE）稳定细胞株构建抗性筛选实验技术介绍： 1、稳定株构建抗性筛选实验方案（设置正常对照组和Puro抗性浓度梯度给药组）： 2、人肝胆管癌细胞（RBE）稳定细胞株构建抗性筛选动态成像时间间隔照片：人肝胆管癌细胞（RBE） 0h ...
悬浮生长的细胞灌满完培，以常温防震运输，细胞活力更高，更便捷实惠。灌装细胞，操作时，避免吹打细胞团，操作缓慢轻柔，减少剪切力对细胞活力的影响。细胞悬液与新鲜完培的比例为约2:1，即：11ml的完培中加入5ml细胞悬液或细胞团。
细胞周期样本固定后，可放置负20度冰箱保存2周实验结果不会明显变化。若需长途运输时，并受到环境温度影响，可添加适量干冰运输。但，建议新鲜样本（样本固定后尽快检测）检测更佳。
科研常用的心肌细胞系有为：AC16（人心肌细胞)、HL-1(小鼠心肌细胞)和H9C2(大鼠心肌细胞)。其在体外高糖H-DMEM（含糖4.5g/L，或25mm）环境下均能很好地生长。但，体外培养均不会看到心肌细胞跳动的现象。
人神经胶质瘤细胞（U-87 MG ）与人胶质瘤细胞（U-251 MG）是人胶质瘤研究常用的细胞系。但，U-87MG ATCC (CVCL_0022)是一个有问题的细胞（Problematic cell lin）
固定过的电镜样本，在运输过程中，固定液切勿冷冻结冰。
细胞铺板后，细胞培养板超净台内水平放置3分钟，再将96孔板水平放入实时动态活细胞成像活细胞（InCucyte）系统，设置明场和绿色荧光）20X或10X成像，每孔成像4个视野。数据分析后，作为细胞接种0h的细胞杀伤/毒性基数。
人正常肺上皮细胞（BEAS-2B）在高糖（含糖25mM或4.5g/L）环境下也能生长，但其在1640培养体系下，细胞增殖更快，细胞形态和活力更好。
预添加细胞凋亡APO-488探针(CellEvent® Caspase-3/7 Green ReadyProbes，绿色荧光）给药后，放置镶嵌有 IncuCyte ZOOM（实时动态活细胞成像观察平台）的CO2培养箱内培养与非浸入细胞培养体系免洗脱式动态监测。
人成纤维细胞（FB）培养条件：89% H-DMEM+10%FBS+1X双抗+5%CO；人成纤维细胞（FB）汇合度大于95%以上，才表现出明显的纤维状。
THP-1细胞通过PMA或者LPS诱导，可成巨噬细胞，半悬浮半贴壁生长。永生化的人巨噬细胞，就是一个稳定的巨噬细胞系，可连续传代。不需要诱导，已具有巨噬细胞的特征。
人肾小管细胞（HK-2）培养条件和材料：培养条件：89% F12/DMEM+10ûS,人肾小管细胞（HK-2）比LX-2细胞好养多，更“皮实”。但还是需要注意操作细节。例如，换液前，一定预热；消化细胞时，不拍打瓶皿等。
实时动态活细胞成像活细胞（InCucyte）系统镶嵌在CO2培养箱中，温度、湿度、O2和CO2浓度均与CO2培养箱一致。所以，可不取出细胞培养板。设置时间轴，可每1h或24h自动检测细胞增殖一次，并数据归集于同一个数据库。
取10ul单细胞悬液（母液），加入预先添加有990ul的完全培养基的1.5ml EP管内，吹打均匀，制备细胞计数用的单细胞工作液。
出于好奇与兴趣爱好，而非学术或研究项目所需。我们自筹经费，将开展NK92自然杀伤细胞对500种细胞增殖、凋亡和杀伤研究。预计在5年内，完成所有实验。
药物配置总原则：首先，要明确药物在不同溶剂中药物的溶解度并配置最大溶解度的药物母液（或接近最大溶解度）；其次，使用配置母液的溶剂配置各个给药浓度1000倍的二级母液；再次，用预热的完培或条件培养基，分别将各个浓度梯度的二级母液稀释1000倍给药。
如何高效快速建立Raw264.7-LPS炎症模型？
a、Raw264.7细胞-LPS炎症模型建立---LPS最佳浓度筛选；
b、Raw264.7细胞-LPS炎症模型建立-LPS浓度与NO表达筛选。
生物安全柜内，绝对不能用酒精灯。绝对不能用，就是不能用。
人肝癌细胞（Hep G2）细胞抱团生长，接种后48h才能完全贴壁，所以复苏贴壁过夜后，不能马上换液。接种96孔细胞给药实验，贴壁过夜后，不能给药。
