培养箱中的多板位活细胞监测分析系统--IncuCyte 赛多利斯(上海)贸易有限公司品牌:Sartorius 两板位型号:IncuCyte SX1 六板位型号:IncuCyte S3/SX5 培养箱内运行示意图 目前,大部分的细胞检测方法采用的仍然是终点法—比如...
基于实时动态活细胞成像技术的人肝胆管癌细胞(RBE)稳定细胞株构建抗性筛选实验技术介绍: 1、稳定株构建抗性筛选实验方案(设置正常对照组和Puro抗性浓度梯度给药组): 2、人肝胆管癌细胞(RBE)稳定细胞株构建抗性筛选动态成像时间间隔照片:人肝胆管癌细胞(RBE) 0h ...
抗体内化检测原理:Incucyte® Fabfluor-pH 抗体标记染料设计为偶联pH 敏感荧光团的Fab 片段,用于快速、简便地标记含Fc 的测试抗体。基于pH 敏感染料的系统利用溶酶体的酸性环境来量化被标记抗体的内化。Fabfluor 标记的抗体位于中性细胞外溶液(pH7.4)中,它们与细胞表面特异性抗原相互作用并被内化。一旦进入溶酶体,它们就会进入酸性环境(pH 值4.5–5.5)。
人卵巢癌细胞( SK-OV-3 )于1973年由Trempe G和Old LJ从一位64岁白人女性卵巢腺癌患者的 腹腔积液中分离获得。该细胞表现出上皮形态,是一种合适的转染宿主细胞系。据报道,它对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物(包括白喉毒素、顺铂和阿霉素)耐受,可在裸鼠中成瘤,且能形成与卵巢原位癌一致的中度分化腺癌。A、细胞培养条件:89% H-DMEM+10%FBS+1X双抗(可不添加)+...
细胞体外培养所需的完全培养基,配置前均需将其组份胎牛血清(FBS,液态)、双抗(可选择添加)从负20度冰箱拿出,放4度冰箱解冻过夜并室温恢复后,才能开始配置。其耗时长,操作较多,容易交叉污染。本次实验测试和体验的即用型完全培养基,由广州蕊特生物科技有限公司研制。其在基础培养基的瓶盖内,镶嵌有已定量的干粉状胎牛血清(含10%FBS)和1X双抗。只需开盖后扭一扭,摇一摇,便可配置好完全培养基(文...
试剂材料保存负20度冰箱5年,是否会挥发?会挥发的。大体积保存,贴上封口膜,放置冰箱的中内左侧,会减少挥发。
在稳定的细胞转染体系内,降低目的质粒的总质量,可提高细胞转染效率,从而提高慢病毒的滴度。
通常,贴壁生长的细胞通过换液方式进行细胞给药。但,悬浮生长或者半悬浮生长的细胞,换液时细胞会大量丢失或者脱落。需采取先给药,再铺板(接种细胞)的方式进行细胞给药。
悬浮生长的细胞灌满完培,以常温防震运输,细胞活力更高,更便捷实惠。灌装细胞,操作时,避免吹打细胞团,操作缓慢轻柔,减少剪切力对细胞活力的影响。细胞悬液与新鲜完培的比例为约2:1,即:11ml的完培中加入5ml细胞悬液或细胞团。
细胞周期样本固定后,可放置负20度冰箱保存2周实验结果不会明显变化。若需长途运输时,并受到环境温度影响,可添加适量干冰运输。但,建议新鲜样本(样本固定后尽快检测)检测更佳。
科研常用的心肌细胞系有为:AC16(人心肌细胞)、HL-1(小鼠心肌细胞)和H9C2(大鼠心肌细胞)。其在体外高糖H-DMEM(含糖4.5g/L,或25mm)环境下均能很好地生长。但,体外培养均不会看到心肌细胞跳动的现象。
人神经胶质瘤细胞(U-87 MG )与人胶质瘤细胞(U-251 MG)是人胶质瘤研究常用的细胞系。但,U-87MG ATCC (CVCL_0022)是一个有问题的细胞(Problematic cell lin)
固定过的电镜样本,在运输过程中,固定液切勿冷冻结冰。
细胞铺板后,细胞培养板超净台内水平放置3分钟,再将96孔板水平放入实时动态活细胞成像活细胞(InCucyte)系统,设置明场和绿色荧光)20X或10X成像,每孔成像4个视野。数据分析后,作为细胞接种0h的细胞杀伤/毒性基数。
人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)在高糖(含糖25mM或4.5g/L)环境下也能生长,但其在1640培养体系下,细胞增殖更快,细胞形态和活力更好。
预添加细胞凋亡APO-488探针(CellEvent® Caspase-3/7 Green ReadyProbes,绿色荧光)给药后,放置镶嵌有 IncuCyte ZOOM(实时动态活细胞成像观察平台)的CO2培养箱内培养与非浸入细胞培养体系免洗脱式动态监测。
人成纤维细胞(FB)培养条件:89% H-DMEM+10%FBS+1X双抗+5%CO;人成纤维细胞(FB)汇合度大于95%以上,才表现出明显的纤维状。
THP-1细胞通过PMA或者LPS诱导,可成巨噬细胞,半悬浮半贴壁生长。永生化的人巨噬细胞,就是一个稳定的巨噬细胞系,可连续传代。不需要诱导,已具有巨噬细胞的特征。
人肾小管细胞(HK-2)培养条件和材料:培养条件:89% F12/DMEM+10ûS,人肾小管细胞(HK-2)比LX-2细胞好养多,更“皮实”。但还是需要注意操作细节。例如,换液前,一定预热;消化细胞时,不拍打瓶皿等。
实时动态活细胞成像活细胞(InCucyte)系统镶嵌在CO2培养箱中,温度、湿度、O2和CO2浓度均与CO2培养箱一致。所以,可不取出细胞培养板。设置时间轴,可每1h或24h自动检测细胞增殖一次,并数据归集于同一个数据库。