黑色素长啥样子的?
小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)在H-DMEM培养体系下培养,细胞汇合度大于80%以上,会出现大量的黑色素斑点现象;100%以上,出现大量黑色素斑块积累现象(见图1)。 如何获得或避免黑色素的积累呢,请参考:“小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)培养经验与技巧” 1、小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)培养条件:89% 1640+10% FBS+1X双抗+5%CO2+O2+37°+95%湿度。或89% 1640+10% FBS+1X双抗+5%CO2+O2+37°+95%湿度 2、培养经验与技巧: a、小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)在H-DMEM培养体系下培养,细胞汇合度大于80%以上,会出现大量的黑色素斑点现象(见上图1和下图2)。通过换液,比较难清除。需要通过预热的PBS 3遍清洗,可清除。
b、小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)在1640培养体系下培养,细胞汇合度大于95%以上,会出现少量的黑色素斑点现象或无此现象(见图3)。通过换液或预热的PBS,可清洗掉。
c、小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)易感染,构建稳定株时,慢病毒上清可感染并筛选出稳定株。若将慢病毒纯化,可提高感染效率,缩短稳定株构建的时间。可通过2ug/ml的 Puro抗性筛选高阳性率的稳定株。 d、冻存时,使用“90% FBS+10% DMSO配方”配置的细胞冻存液,复苏时细胞成活率更高,优于:RPMI-1640:FBS:DMSO=7:2:1 3、细胞特征编码:STR-12523-B16-F10-1640-TryEDTA=1min-TransMed=48h-DT=12h-AdherentT=24h-Puro=2ug/ml |