细胞实验药物配置方法（精华版）秒藏

1、熟悉目的药物理化性质
熟悉目的药物的存在形式（固体、液体还是悬浊液）、纯度、规格及其在不同溶剂中的溶解度。以黄连素为例：其在水中不溶，在DMSO溶剂中溶解度为67.23mM。

2、确定药物母液浓度，计算配置剂量。
通常配置药物母液浓度越接近最大溶解度，越可确保在避免溶剂自身对细胞增殖和凋亡等的影响之外，配置更高的给药工作液浓度。

例如：黄连素在DMSO中溶解度为67.23mM，考虑实际其在DMSO中溶解性可能降低。使用DMSO溶剂和10mg包装规格的黄连素配置50mM的母液。计算如下：

即：无菌环境下，取537.9ul的DMSO重溶离心过的10mg黄连素干粉药物。

请注意：DMSO本身具有杀菌作用，高浓度杀菌效果更好。所以，配置药物后，无需用0.22uM过滤器过滤。另，若过滤，药物母液损耗非常大。

3、设计给药方案

以MCF-7、A375和HepG2细胞（3种细胞）的黄连素浓度梯度给药，筛选对细胞增殖影响的安全剂量为例。必须设置：正常对照组、溶剂对照组和阳性对照组。给药方案如下（此方案设计软件，添加微信号码CytoBiotech-G免费领取。）：

4、药物配置

药物配置总原则：首先，要明确药物在不同溶剂中的溶解度，并配置最大溶解度的药物母液（或接近最大溶解度）；其次，使用配置母液的相同溶剂，配置各个给药浓度1000倍的二级母液；再次，用预热的完培或条件培养基，分别将各个浓度梯度的二级母液稀释1000倍给药。

A、取药物母液（50mM），使用溶剂DMSO配置各个浓度梯度的药物二级母液（可直接用母液配置，也可以用上一个浓度的药物母液配置。）。

B、分别取药物各个浓度梯度二级母液（50mM、25mM、12.5mM、6.25mM），使用预热的完陪（或基础培养基），配置各个浓度梯度的给药工作液（50uM、25uM、12.5uM、6.25uM）。

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