出于好奇与兴趣爱好，而非学术或研究项目所需。我们自筹经费，将开展NK92自然杀伤细胞对500种细胞增殖、凋亡和杀伤研究。
预计在5年内，完成所有实验。
2025年春节前，将完成100株细胞的共培养实验。
本周，已经完成了自然杀伤细胞（NK92）对6种细胞增殖、凋亡和杀伤研究。相关数据，将陆续在公众号分享。
本周涉及到共培养的：
a、靶向细胞分别为：小鼠胚胎成纤维细胞(3T3-L1)、小鼠成纤维细胞（NCTC clone 929）、人成纤维细胞（FB）、小鼠腹腔巨噬细胞Raw264.7、人肝星状细胞(LX-2)、人肾小管细胞（HK-2）。
b、效应细胞为：人自然杀伤细胞（NK-92）。
若您对我们的小小研究实验感兴趣和支持，请在公众号（实时动态活细胞成像中心）每篇研究数据分享的文末，
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10元，可买块细胞培养板；
100元，买2瓶H-DMEM培养基，
我们不嫌少；
1000元，买1瓶X-VIVO-15培养基，
10000元，买一只“死亡细胞监测的探针YOYO-3”，也不嫌多。
1、本研究检测方法和设备，主要依赖于InCuCyte动态活细胞成像系统。
2、本研究的效应细胞非常重要，相关基础信息如下：
a、NK-92细胞改良培养条件（目前培养条件）：X-VIVO-15培养基+200 U/mL IL2+5%CO2+O2+95%湿度+37度；不需要添加FBS（胎牛血清）。
b、NK-92细胞培养方法：当细胞成较多“葡萄串”状，透过灯光明显可见大量细胞“颗粒”，表明此细胞生长状态良好。培养基颜色发生变化时或2-3天，通过每次添加4-5ml的完全培养基来代替换液，并垂直放置培养瓶(透气瓶）。当T25瓶内培养基总体积超过25ml以上，可考虑直接传代并补加2倍传代细胞悬液总体积的完全培养基继续扩增；或细胞离心后，细胞计数按照1*10e6/T25瓶/6ml培养体系传代。
c、NK-92细胞STR鉴定，100%匹配。
d、NK-92细胞活性鉴定：细胞活力鉴定（20X活细胞成像）：细胞活力大于90%。
绿色斑点（细胞）为YOYO-1染色的死亡细胞。未被染色的细胞（不带绿色荧光的细胞）均为活细胞。
e、NK-92细胞表面标记物CD56流式鉴定：
3、本研究使用的检测探针、培养基和胎牛血清，也非常重要。如下：
a、死亡细胞监测探针：YOYO-1（绿色）和YOYO-3（红色）；
b、效应细胞所需的X-VIVO-15培养基：Lonza，Cat#04-418Q；
c、重组IL-2细胞因子：北京同立海源，Cat#TL-509；
d、靶向细胞培养所需的胎牛血清（FBS），Cytobiotech/驷拓柏腾，Cat#FBS-F。
期待我们小小研究实验的开展与分享，给您带来更多意外。
也期待广大科研爱好者和大咖的支持和指正。
