THP-1细胞与永生化的人巨噬细相同的点
均使用1640培养体系。培养条件和材料如下:
培养条件:89% 1640+10%FBS+1X双抗+5%CO2+37℃+O2+95%湿度。
A、1640:Corning,Cat#10-092-CVRC。
B、FBS(胎牛血清):CytoBiotech(驷拓柏腾),Cat#FBS-F-500。
C、双抗:CytoBiotech(驷拓柏腾),Cat#PS-100X,使用浓度1X。
D、细胞支原体污染预防试剂:CytoBiotech(驷拓柏腾),Cat#O-V3-B5-1ml。
THP-1细胞与永生化的人巨噬细胞不同的点
1、生长习性与形态不同:
A、THP-1细胞悬浮生长,中高密度成团或串状,半悬浮半贴壁。
B、永生化的人巨噬细胞贴壁生长,成簇状或整齐的铺路石状,接种贴壁过夜后,略带触角。
2、换液和培养方式不同:
A、THP-1细胞悬浮生长,可通过补液垂直放置培养。
B、永生化的人巨噬细胞贴壁生长,需要通过换液方式实现营养补给,需水平放置培养。
3、传代(细胞计数)方式不同:
A、THP-1细胞悬浮生长,可通过吹打(约10次)成单悬液,稀释后细胞计数(接种96孔板3分钟以上,可单层沉降板子底部成像计数)或传代接种。
B、永生化的人巨噬细胞贴壁生长,需要通过胰酶37度消化2分钟后终止消化,再吹打成单悬液,稀释后细胞计数或传代接种。
4、倍增时间、代谢或换液频率不同:
A、THP-1细胞,约36h倍增一代。按照5*10e5细胞接种T25瓶5ml,3天培养基不变黄,不需要补液(完培)。
B、永生化的人巨噬细胞,12h倍增一代,跟Raw264.7细胞倍增时间一样。按照1*10e5细胞接种T25瓶5ml,48小时后培养基发黄。后续还需要按照倍增1.5-2倍的体积(8-15ml)每天换液一次。
THP-1细胞与永生化的人巨噬细胞的交集
A、THP-1细胞通过PMA或者LPS诱导,可成巨噬细胞,半悬浮半贴壁生长。
B、永生化的人巨噬细胞,就是一个稳定的巨噬细胞系,可连续传代。不需要诱导,已具有巨噬细胞的特征。
THP-1细胞与永生化的人巨噬细胞共培养有啥现象发生呢?
请关注下期笔记文章---“永生化的人巨噬细胞会不会杀伤THP-1细胞?”。