共聚焦皿包被（鼠尾胶原）方法技巧和经验

图1：包被过鼠尾胶原的35mm共聚焦皿照片；

图2：标记过的35mm共聚焦皿照片；

图3：共聚焦皿包被（鼠尾胶原）计算、配置和方法技巧照片。

鼠尾胶原包被配置方法：

1、取1ul冰醋酸母液（7400g/L)，加入19.999ml无菌水，便可配置成浓度为无菌 0.006 M（0.36g/L）乙酸（二级母液）20ml。

2、取配置的0.36g/L乙酸（二级母液）3591.36ul添加8.64ul 母液浓度为5mg/mL的鼠尾胶原，便可得到：0.012 mg/mL的鼠尾胶原工作浓度。

3、按照300ul/35mm共聚焦的剂量，将鼠尾胶原工作浓度缓慢添加到35mm共聚焦底部玻片上，均匀分布，不溢出玻片，无气泡。

4、打开共聚焦盖，超净台室温过夜晾干。

5、预冷的PBS清洗2遍，盖上盖培养箱37度30分钟烘干，接种细胞备用。