人肝癌细胞(Hep-G2/2.2.15)细胞培养经验和技巧
1、人肝癌细胞(Hep-G2/2.2.15)培养条件:89% 1640+10% FBS+1X双抗+5%CO2+O2+37°+95%湿度。 2、培养经验与技巧: a、细胞抱团生长,接种后48h才能完全贴壁,所以复苏贴壁过夜后,不能马上换液。若一定要换液,收集上清接种新的瓶皿继续培养。 b、细胞汇合度大于45%时,每24h换液一次,每次换液的培养基总体积为上次的1.5倍。 c、此细胞慢病毒感染难度适中,构建稳定株时若带Puro基因,可添加4ug/ml的嘌呤霉素(Puro)抗性筛选96h后,才能获得阳性率大于90%的稳定株细胞。更高阳性率,后续还需进一步抗性筛选。 d、此细胞携带HBV基因,常规无菌环境操作,其不会对人或环境产生污染或感染。但使用时需做好防护。 e、此细胞培养生长过程中会有大量空泡,从引进回来一直有。未见影响其生长增殖。对此依然迷惑不解。 3、细胞特征编码: STR-11221-Hep-G2/2.2.15-1640-Puro=4ug/ml-TryEDTA=4min-TransMed=24h-G2=24h-AdherentT=24h 4、细胞照片:
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细胞培养技巧与经验
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