人肝癌细胞（Hep G2）细胞培养经验和技巧

1、人肝癌细胞（Hep G2）培养条件：89% H-DMEM+10% FBS+1X双抗+5%CO2+O2+37°+95%湿度。

2、培养经验与技巧：

a、细胞抱团生长，接种后48h才能完全贴壁，所以复苏贴壁过夜后，不能马上换液。接种96孔细胞给药实验，贴壁过夜后，不能给药。至少需接种36h以上才能换液给药。若一定要换液，收集上清接种新的瓶皿继续培养。

b、细胞汇合度大于45%时，每24h换液一次，每次换液的培养基总体积为上次的1.5倍。

c、此细胞慢病毒感染难度适中，构建稳定株时若带Puro基因，可添加4ug/ml的嘌呤霉素（Puro）抗性筛选96h后，才能获得阳性率大于90%的稳定株细胞。更高阳性率，后续还需进一步抗性筛选。

3、细胞特征编码：STR-12138-Hep G2-H-DMEM-TryEDTA=2min-TransMed=72h-G=24h-AdherentT=48h

4、细胞照片：40倍（图2）、100倍（图3）和200倍（图1）