细胞碎片去除操作方法和步骤来源:实时动态活细胞成像中心公众号 ![]() 此细胞碎片去除操作操作方法和步骤,适合悬浮生长的细胞。 1、【吸取细胞团或颗粒】去除碎片操作方法与步骤:A、 核心原理该方法利用细胞团块/活细胞聚集体与单个死细胞/微小碎片在重力作用下的沉降速度差异。通过静置培养瓶(T25瓶-A),让较重的活细胞团自然沉降到瓶底,而较轻的碎片则悬浮在上清中。随后通过精准吸取瓶底沉积物,实现“去碎片、留活细胞”的目的。 B、 详细步骤与要点![]()
2、【吸取上清低速离心去除细胞碎片】操作方法与步骤:A、核心原理:差速离心(Differential Centrifugation)此方法利用不同大小的细胞组分(完整细胞 vs. 微小碎片)在离心力下的沉降速度差异进行分离: 低速离心(500 rpm):此转速产生的离心力较小,仅能让较大的完整细胞团沉淀下来,而体积更小的细胞碎片、凋亡小体则大部分悬浮在上清中。 分离策略:通过保留上清(富含碎片)或沉淀(富含活细胞),实现对细胞群体的物理纯化。 B、 详细步骤与要点![]() 备注:上述操作,可以把1和2合并成一起操作(但分开操作)细胞碎片去除更彻底。但,不同细胞,不同程度的细胞碎片,操作效果略有差别。 ![]() 人急性髓性白血病细胞(MOLM13)细胞碎片去除后的碎片照片3、与其他去碎片方法的对比
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