西安赛拓博泰生物科技有限公司

细胞碎片去除操作方法和步骤

作者:Cell Gao来源:实时动态活细胞成像中心公众号
人急性髓性白血病细胞(MOLM13)细胞碎片去除前照片

此细胞碎片去除操作操作方法和步骤,适合悬浮生长的细胞。

1、【吸取细胞团或颗粒】去除碎片操作方法与步骤:A、 核心原理

该方法利用细胞团块/活细胞聚集体单个死细胞/微小碎片在重力作用下的沉降速度差异。通过静置培养瓶(T25-A),让较重的活细胞团自然沉降到瓶底,而较轻的碎片则悬浮在上清中。随后通过精准吸取瓶底沉积物,实现去碎片、留活细胞的目的。

B、 详细步骤与要点

人急性髓性白血病细胞(MOLM13)碎片去除后的目的细胞照片

2、【吸取上清低速离心去除细胞碎片】操作方法与步骤

A、核心原理:差速离心(Differential Centrifugation)

此方法利用不同大小的细胞组分(完整细胞 vs. 微小碎片)在离心力下的沉降速度差异进行分离:

低速离心(500 rpm:此转速产生的离心力较小,仅能让较大的完整细胞团沉淀下来,而体积更小的细胞碎片、凋亡小体则大部分悬浮在上清中。

分离策略:通过保留上清(富含碎片)或沉淀(富含活细胞),实现对细胞群体的物理纯化。

B、 详细步骤与要点

备注:上述操作,可以把12合并成一起操作但分开操作细胞碎片去除更彻底。但,不同细胞,不同程度的细胞碎片,操作效果略有差别。

                 人急性髓性白血病细胞(MOLM13)细胞碎片去除后的碎片照片

3、与其他去碎片方法的对比

方法

原理

适用场景

缺点

本方法(低速离心)

物理沉降速度差异

易结团细胞、原代细胞

需精确控制转速,对严格单细胞效果一般

常规高速离心

惯性力

绝大多数细胞系

碎片常与细胞共沉淀,去碎片效果差

细胞滤网过滤

物理筛分

悬浮细胞、去除大块死细胞团

滤网可能吸附细胞,造成损失

密度梯度离心

密度差异

高纯度分离(如PBMC提取)

成本高,操作复杂,不适合日常传代


在线客服
 
 
 
 
 联系方式
客服热线:13991257470
邮箱:CytoBio@qq.com