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培养箱中的多板位活细胞监测分析系统--IncuCyte 赛多利斯(上海)贸易有限公司品牌:Sartorius                           两板位型号:IncuCyte SX1         六板位型号:IncuCyte S3/SX5                              培养箱内运行示意图    目前,大部分的细胞检测方法采用的仍然是终点法—比如...

基于实时动态活细胞成像技术的人肝胆管癌细胞(RBE)稳定细胞株构建抗性筛选实验技术介绍:   1、稳定株构建抗性筛选实验方案(设置正常对照组和Puro抗性浓度梯度给药组):                                                 2、人肝胆管癌细胞(RBE)稳定细胞株构建抗性筛选动态成像时间间隔照片:人肝胆管癌细胞(RBE) 0h           ...

细胞铺板后,细胞培养板超净台内水平放置3分钟,再将96孔板水平放入实时动态活细胞成像活细胞(InCucyte)系统,设置明场和绿色荧光)20X或10X成像,每孔成像4个视野。数据分析后,作为细胞接种0h的细胞杀伤/毒性基数。

预添加细胞凋亡APO-488探针(CellEvent® Caspase-3/7 Green ReadyProbes,绿色荧光)给药后,放置镶嵌有 IncuCyte ZOOM(实时动态活细胞成像观察平台)的CO2培养箱内培养与非浸入细胞培养体系免洗脱式动态监测。

药物配置总原则:首先,要明确药物在不同溶剂中药物的溶解度并配置最大溶解度的药物母液(或接近最大溶解度);其次,使用配置母液的溶剂配置各个给药浓度1000倍的二级母液;再次,用预热的完培或条件培养基,分别将各个浓度梯度的二级母液稀释1000倍给药。

“黑胶虫”的消杀最好从细胞复苏开始,一旦细胞贴壁生长后,“黑胶虫”清洗和消杀难度大幅度增加。被“黑胶虫”污染的细胞,400倍显微镜下可见有小黑点在振动。有时呈点状,有时呈小片状,。类似布朗运动。“黑胶虫”常与细胞背景脏污染现象一起发生。

细胞复苏核心操作为冻存管1/2处以下浸入37C°水浴锅,按照4次/秒的频率晃动,确保细胞快速解冻。细胞复苏后,将1.8ml的冻存管用5ml离心管适配配平,直接1200转离心5分钟取上清(冻存液),不需要添加完培稀释冻存液再离心。

悬浮细胞表面分子免疫荧光染色,是否需要固定?

以贴壁细胞96孔板给药的细胞实验为例,其他孔板同理。若为细胞爬片的固定,请参考“免疫荧光电镜细胞爬片(24孔板)制作、固定和取出操作步骤”。

细胞传代操作步骤(适合贴壁生长的细胞)

细胞冻存操作步骤(适合贴壁生长的细胞)

本实验室细胞识别特征编码(代码)标记描述a、STR:表明此细胞在本细胞库做过STR鉴定,并STR等位基因与ATCC或DMSZ或其他细胞库一致;b、TryEDTA:细胞消化条件和时间,通常使用的为0.25%含EDTA的胰酶。c、DT或G:细胞倍增周期或时间;d、TransMed:细胞换液或补液周期(*1.5T为下次换液的总体积为上次的1.5倍);e、Puro:稳定株筛选时嘌呤霉素抗性有效浓度;...

灌满液运输和3D运输【贴壁生长细胞】制备操作说明本操作适用于贴壁生长的细胞第一、灌满液运输【贴壁生长细胞】制备说明:1、【消毒观察】收到细胞,T25瓶表面75%酒精消毒后,显微镜下4X、10X、20X观察(是否有细胞脱落或碎片,是否有污染、形态是否完整)。2、【细胞恢复】去掉封口膜,酒精棉球擦拭瓶颈和瓶盖,垂直放置37°CO2培养箱里,再松一圈瓶盖,培养(恢复)30分钟。3、【观察细胞】再次...

常温运输的【悬浮生长细胞】制备操作说明‍本操作适用于悬浮生长的细胞第一、悬浮生长细胞共同特性:生长方式: 悬浮生长培养方式:垂直放置CO2培养箱(5%CO2+37°+95%湿度),通气培养(无菌)运输条件:常温运输细胞生长习性:X细胞(例如K562、NK-92、THP-1等)悬浮生长,不能直接换液。可通过补液后垂直培养实现营养补充。若需要换液,先2000转离心5分钟,弃掉上清再用完全培养基重...

基于实时动态活细胞成像技术和流式细胞分选单细胞技术应用介绍

基于实时动态活细胞成像技术的TransWell监测细胞迁移浸润技术应用介绍

方法:细胞增殖融合度(Confluence)IC50法操作步骤:1、挑选不同浓度药物作用细胞某个时间点的融合度(Confluence);2、计算-细胞增殖抑制率;3、通过GraphPad Prism 5软件计算IC50值1-1、挑选不同浓度药物作用细胞某个时间点的融合度(Confluence)2-2、细胞增殖抑制率(%)计算(Excel)细胞增殖抑制率(%)=1-(A/B)   A:实验组或...

高通量悬浮细胞/微珠筛选系统应用介绍  Que™ Screening SystemHigh-Throughput Cell-Based Screening in SuspensionHigh Throughput and High Content, Small Volume Flexibility, Ease of Use, Automation   Antibody Discovery, ...

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