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借助实时动活细胞成像系统的细胞侵袭迁移TransWell实验,不需要去掉上室基顶膜结晶紫染色。并每个下室孔可实现0h、24h、48h、72h和96h细胞侵袭迁移细胞照片和数据的采集,不需要接种多个小室以时间点来采集数据。

常规细胞培养时,按照3ul(O-V3-B5)/ml完全培养基剂量,添加高效细胞微生物防治试剂(O-V3-B5)到预热的完培中,换液培养,便可预防常见的“细胞背景脏小黑点”污染。

悬浮生长的细胞,用慢病毒感染构建稳定株,还是腺病毒感染瞬时表达呢?不管慢病毒还是腺病毒感染悬浮细胞,若带有荧光报告基因(GFP、RFP等)可直观判断感染效率。

细胞消化、传代、接种等操作,尤其细胞冻存时,为何均需要缓慢操作,避免产生气泡呢?小体积吸取液体(培养基或试剂材料)或移液,避免产生大量气泡。

“润湿消化法”消化传代细胞操作步骤如下:a、吸弃或倒掉培养瓶内所有培养基。b、预热的PBS清洗两遍,分别4ml和3ml。c、吸取500ul含EDTA的胰酶滴加入T25瓶内,轻轻水平晃动。d、待胰酶均匀润湿细胞表面后,计时10秒。吸出所有的胰酶,盖上盖。e、将T25瓶水平放置37度培养箱,孵育消化细胞2分钟。f、无菌环境,向T25瓶内添加3ml完培(或专培,依据细胞培养条件而定。本操作视频以H...

转染时,血清含量不影响转染效率;但未预热的培养基会影响转染效率。转染后 6-12h时,按照3ml /6孔板单孔,换液H-DMEM条件培养基(含5ûS,含糖25mM,不含双抗)扩增48h病毒。

通过每孔中心点做红黑线,可批量细胞划痕96孔板、48孔板...6孔板。

CO2细胞培养箱的一层(最下层邻近水盆)左侧边缘位置水分挥发最快。

共聚焦接种细胞时,只需直接接种到内直径15mm的载玻片上,接种总体积不超过150ul。.给药或造模,固定后荧光染色再共聚焦成像。

透气盖的T25细胞培养瓶:常用包括贴壁生长细胞和悬浮细胞常规细胞的培养、扩增保种。密封盖的T25细胞培养瓶:适合于对CO2敏感的细胞或培养基。

按照300ul/35mm共聚焦的剂量,将鼠尾胶原工作浓度缓慢添加到35mm共聚焦底部玻片上,均匀分布,不溢出玻片,无气泡。

活细胞具有饱满的形态和结构,四周发亮。死亡细胞或者凋亡细胞,会有明显的重影(细胞外周还有一圈环形的圆圈),与活细胞形态和状态差别非常明显。

多聚赖氨酸包被操作:无菌环境下,按照85ul/Well for 96 Plate 。吸取0.01%的多聚赖氨酸工作液,从96孔板9点钟方向,枪头倾斜45度缓慢添加到孔内.

慢病毒或腺病毒纯化时,4740转(4005g )离心30分钟即可获得病毒沉淀。(4500转会让5ml离心管盖脱落,管底破裂。)

试剂盒法分离人外周血造血干细胞的细胞量非常大,CD34+阳性率到底有多高呢

胫骨需要在预冷的PBS或分离试剂盒中的样本稀释液中剪裁成4段,分别用5ml注射器重悬,才能获得大量骨髓来源的中性粒细胞。

药物母液浓度为100mg/ml(溶剂为:DMSO,溶解度为:100mg/ml),给药时25ug/ml工作液如何配置?

免疫磁珠与细胞结合的方式为多对一,即至少2个以上磁珠通过抗体抗原特异性结合到细胞表面。

污染治疗方法:1、小鼠B细胞淋巴瘤(A20)被未知真菌,10X或20X镜下可见真菌孢子。2、超净台内将小鼠B细胞淋巴瘤(A20)分别使用5ml和3ml的PBS清洗细胞2遍;3、按照每1ml的培养体系内添加6ul“O-V3-B5”(6ul/ml)到T25瓶内,4、水平放置37度CO2培养箱正常和治疗48h。5、48h后显微镜成像和观察,污染被清除。治疗结果:后续无双抗培养,未在出现此污染A、小...

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