西安赛拓博泰生物科技有限公司

产品详情
分享到:

多能高效细胞微生物污染防治科研试剂(O-V3-B5)-II

品牌: CytoBiotech(驷拓柏腾)
货号: O-V3-B5-200ul
规格: 200ul/管
应用: 可预防和治疗细菌、支原体、黑胶虫、背景脏、真菌等微生物污染。具体方法参考说明书。仅限用于科研。
保存条件: 4度
运输条件: 常温运输
价格: 询价
产品详情
产品评论(0)



多能高效细胞微生物污染防治科研试剂说明书



【名称】多能高效细胞微生物污染防治科研试剂(O-V3-B5)II

【货号】O-V3-B5-1ml或O-V3-B5-500ul或O-V3-B5-200ul

【规格】1ml/管或500ul/管或200ul/管

【浓】100X

【工作浓】推荐:3ul/ml(预防浓度) 或6ul/ml(治疗浓度)完全培养体系(可不含双抗)

【运输和贮藏】常温运输,4℃避光储存

【生产日期】见外包装批次(Lot#)

【有效期】3年

【生产企业】西安赛拓博泰生物科技有限公司

组分和应用】“多能高效细胞微生物污染防科研治试剂(O-V3-B5)II”,由耐虫害植物活性成分提取物、抗生素、两性霉素B、维生素、量子硒等一系列生物制剂配伍而成的科学研究用试剂(非临床或医用药物)。主要用于预防和治疗细胞、血清、培养基、液体中的细菌、真菌、支原体、黑胶虫、背景脏(不明微生物污染)等微生物的污染,促进细胞贴壁和细胞适应培养环境。

产品特点

1.本品对人和环境安全。无微生物传染性污染,气味污染,无颜色,无光污染。

2.本品较低时(1X以下工作浓),对常规细胞无毒副作用,对细胞功能无明显干扰高浓(3X以上),可抑制细胞的增殖,也可能会与细胞、培养瓶皿底物粘连、结晶与析出。3.本品可于青霉素和链霉素双抗(1X)协同用于细胞培养,无不良反应。

4.本品用于细胞污染治疗6天以上,可消除培养体系中的细菌和酵母菌的污染;持续治疗10天以上,可消除培养体系中的黑胶虫的污染;持续治疗14天以上,可消除培养体系中的支原体的污染持续治疗20天以上,可彻底消灭适的微生物污染(严重的微生物污染,细胞本身损失严重,治疗效果不佳)。

5.使用本品时,目的细胞若为肿瘤细胞,可适当增加浓度(50至70ul/T25瓶/5ml完全培养基体系),甚至更高,杀菌效果更好。但,请注意,避免(O-V3-B5)药物析出。


细菌污染预防和治疗使用方法】

细胞培养常见的细菌污染主要表现为螺旋状细菌类芽孢杆菌污染。

a、螺旋状细菌污染的表现形式:在200倍显微镜下,可见细胞完全培养基内有螺旋或弓形或弧形小虫子游动。污染12-24h,完全培养基会变浑浊

b、类芽孢杆菌污染的表现形式:在200倍显微镜下,可见在细胞完全培养基内有杆状游动的小虫子。增殖很快,但完全培养基不会变浑浊杆菌污染照片如下:       


                                                                                图1 HepG2细胞杆状细菌污染照片(200倍)

细菌污染预防方法:按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/5ml完全培养基的剂量添加

细菌污染治疗方法

1. 弃掉培养基,按照3ml(PBS)/T25瓶剂量,清洗细胞3遍。

2. 按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/2ml完全培养基的剂量添加O-V3-B5药物到T25瓶内,放入培养箱培养30min。

3. 接着弃掉完全培养基,按照3ml(PBS)/T25瓶剂量,清洗细胞3遍。

4. 按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/5ml完全培养基的剂量添加O-V3-B5药物到T25瓶内,放入培养箱正常培养消杀48h。

5.消杀48h后显微观察和换液每48h换液治疗一次,连续治疗7天,即可完全清除常见细菌的污染。



真菌污染预防和治疗使用方法】

细胞培养常见的真菌污染主要表现为酵母菌和假丝酵母污染。

a、酵母菌污染的表现形式:在100倍显微镜下,可见细胞完全培养基内有圆形、卵形或椭圆形的颗粒物质,并12h后大量出现。但出芽生殖,不游动,完全培养基不会变浑浊。

B、假丝酵母污染的表现形式:在100倍显微镜下,可见在细胞完全培养基内有丝状、杆状、簇状、团状不游动假菌丝,不产生子囊孢子的丝状物质。但出芽生殖,不游动,完全培养基不会变浑浊。

真菌污染照片如下:

图2   H-ADMSC细胞假丝酵母污染照片(100倍)





3   H-ADMSC细胞假丝酵母污染照片(100倍)






图4   A2780细胞球状真菌污染照片(100倍)




5   A2780细胞球状真菌污染照片(100倍)



真菌污染预防方法:按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/5ml完全培养基的剂量添加

真菌污染治疗方法

1. 弃掉培养基,按照3ml(PBS)/T25瓶剂量,清洗细胞3遍。

2. 按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/2ml完全培养基的剂量添加O-V3-B5药物到T25瓶内,放入培养箱培养30min。

3. 接着弃掉完全培养基,按照3ml(PBS)/T25瓶剂量,清洗细胞3遍。

4. 按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/5ml完全培养基的剂量添加O-V3-B5药物到T25瓶内,放入培养箱正常培养消杀48h。

5.消杀48h后显微观察和换液每48h换液治疗一次,连续治疗7天,即可完全清除常见细菌的污染。

支原体污染预防和治疗使用方法】支原体污染的表现形式:在细胞培养的时候,无明显现象,但细胞增殖缓慢qPCR或其他支原体检测呈现阳性(水煮法),培养基不浑浊,无游动物质。

支原体污染照片和数据如下:

                         

6   SNU-449细胞支原体污染照片(100倍)




7   使用O-V3-B5药物治疗后照片(100倍)




处理前



处理后



8   SNU-449细胞支原体污染检测数据




9   SNU-449细胞支原体污染检测结果



10   SNU-449细胞支原体污染检测结论

备注:以上使用本公司O-V3-B5药物治疗支原体污染前后的照片和数据均由吴帆博士提供,若需使用,请先征求同意(由上海吉凯基因化学技术有限公司提供支原体检测服务)。

支原体污染预防方法:按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/5ml完全培养基添加,48h换液一次,连续预防3个周期(48h/周期)。支原体污染治疗方法:五疗程治疗法,具体如下:

治疗时细胞融合控制在35%-80%最佳。

1.第一疗程:50ulO-V3-B5/T25/5ml完全培养基体系,持续48h不换液。连续治疗2个周期(48h/周期)。若有析出,适当降低浓

2.第二疗程:45ul O-V3-B5/T25/5ml完全培养基体系,持续48h不换液。

3.第三疗程(冲击疗法):55ul O-V3-B5/T25/5ml完全培养基体系,持续48h不换液。

5.第四疗程:正常培养48h-96h。

6.取细胞样本PCR法检测支原体,或取细胞培养液水煮法检测支原体。

黑胶虫污染预防和治疗使用方法】黑胶虫污染的表现形式:黑胶虫污染在400倍显微镜下看到培养液中有小黑点在振动。小黑点有时呈点状,有时呈小的片状,运动形式为在原地振动,类似布朗运动。

黑胶虫污染预防方法:按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/5ml完全培养基的剂量添加,48h换液一次,连续预防3个周期(48h/周期)。黑胶虫污染治疗方法

1、复苏细胞时,在盛有预热的4ml完全培养基的5ml或15ml离心管中,预先添加50ul O-V3(100X)母液,混匀;

2、37水浴锅快速震荡复苏细胞至绿豆大小的冰粒,冻存管表面喷洒酒精后,超净台内移液至上述离心管中,并清洗两遍,混匀。

3、1000 r/min速度离心5min,去除上清。

4、用5ml的完全培养基重悬细胞沉淀,并添加60ul O-V3(100X)母液。混匀,垂直放置37培养箱,消杀30分钟。

5、吸取细胞上清到60Dish或T25瓶正常培养与观察。

6、自然沉降的细胞沉淀,用4ml的完全培养基重悬,种植于新的T25瓶(2个或1个T25,依据细胞量而定)中,并按照35ul(O-V3-B5)/T25瓶/5ml完全培养基的剂量添加O-V3-B5药物到T25瓶内,放入培养箱正常培养消杀48h。

7、消杀48h后显微观察和换液。每48h换液治疗一次,连续治疗10天,即可完全清除常见细菌的污染。


备注

1.本试剂仅供科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

2..本试剂在Lot#12058-20210516批次中使用“多能高效细胞微生物污染防治药物(O-V3-B5)II”,按照科研试剂管理规范,后续生产批次以“多能高效细胞微生物污染防科研治试剂(O-V3-B5)II”产品名称为准,但配置和效果一致。

3.本试剂说明书中“驷拓柏腾CytoBiotech®及其图片”,均为本公司已注册的商标(国际分类:5类;注册号:20757721;商标有效期:2018-02-14至2028-02-13)



在线客服
 
 
 
 
 联系方式
客服热线:029-82569503
邮箱:CytoBio@qq.com